Protocoles d'analyses du sperme et des interactions spermatozoïdes - glaire cervicale

Mesure de la viabilité

Ce test doit être fait au moment de la première mobilité.

Cette méthode permet de mettre en évidence l’état de la membrane plasmique des spermatozoïdes.

• Si celle-ci est perméable, le spermatozoïde est alors mort et il se colore en rose.
• Si elle est imperméable, le spermatozoïde est vivant et il ne prend pas la couleur.

Grossissement.(Objectif 100x immersion).

Réactif

• Eosine Fluka 45240 50g. à préparer à 1% dans l’eau distillée, puis filtrer.
• Nigrosine Merck Art.10172 (pour microscopie) à préparer à 10% dans l’eau distillée, puis filtrer.

Méthode

• Déposer dans un tube, 1 goutte de sperme plus 2 gouttes d’éosine.
• Mélanger.
• Attendre 30 secondes.
• Ajouter 3 gouttes de Nigrosine.
• Mélanger.
• Attendre 30 secondes.
• Tirer 2 frottis épais.
• Sécher à l’air.
• Compter 100 cellules (objectif immersion 100x).

Valeurs normales

• ≥50% de spermatozoïdes vivants.

Attention le nombre de spermatozoïdes immobiles (cf. mobilité) ne doit pas excéder le nombre de spermatozoïdes vivants.

Si le nombre de vivants dépasse de 20% ou plus, le nombre de mobiles de la catégorie 2 et 3, le résultat suppose une anomalie structurelle du flagelle (spermatozoïdes vivants mais immobiles).